Isi kandungan:

Bagaimana anda memilih klon?
Bagaimana anda memilih klon?

Video: Bagaimana anda memilih klon?

Video: Bagaimana anda memilih klon?
Video: Каминоанцы - Армия клонов - Возрожденный Император (ПОЛНАЯ ИСТОРИЯ клонов) 2024, November
Anonim

Bila memilih a klon , pastikan bahawa akarnya kuat, putih dan bersemangat menonjol dari medium tumbuh. Jika akarnya berwarna coklat dan layu, atau sebaliknya kelihatan tidak aktif, letakkan semula dan cari yang lebih baik.

Selain itu, bagaimanakah anda mengklonkan satu sel?

  1. Kira sel untuk meletakkan ~16, 000 sel ke dalam telaga pertama (A1) plat 96 telaga yang mengandungi 200 µL medium.
  2. Keluarkan 100 µL daripada sel yang mengandungi A1 dan campurkan dengan B1, paipkan ke atas dan ke bawah 3x untuk sebati sebelum mengeluarkan 100 µL dan campurkan dengan C1, dsb.

Juga, bagaimana anda memilih koloni sel mamalia? Letakkan pinggan di bawah mikroskop untuk memilih sihat yang tidak dibezakan tanah jajahan . Pilih koloni menggunakan pipet P-20 yang ditetapkan kepada 10ul. Berhati-hati pilih a tanah jajahan tanpa memecahkan tanah jajahan menjadi bujang sel , dan pindahkannya ke dalam plat 96-telaga dengan trypsin. Pipet ke atas dan ke bawah beberapa kali untuk menyebarkan tanah jajahan.

Sejajar dengan itu, bagaimanakah anda menggunakan silinder klon?

menggunakan forsep sederhana steril, angkat a silinder pengklonan . Tekan perlahan bahagian bawah rata silinder ke dalam gris silikon licin dan keluarkan dengan gerakan menegak secara tiba-tiba. Jika dilakukan dengan betul, ini akan memberikan pengagihan gris yang sekata pada bahagian bawah silinder . Menetapkan silinder atas tanah jajahan.

Bagaimanakah anda memilih koloni untuk garisan sel yang stabil?

Protokol untuk menjana talian sel yang stabil memerlukan beberapa langkah seperti yang ditunjukkan di bawah:

  1. Hasilkan keluk bunuh untuk menentukan kepekatan antibiotik pilihan yang optimum.
  2. Transfeksi sel dengan binaan plasmid yang dikehendaki
  3. Pilih dan kembangkan koloni poliklonal yang stabil.
  4. Kenal pasti klon tunggal dengan pencairan dan pengembangan terhad.

Disyorkan: