Apakah tujuan menggunakan ddNTPs?
Apakah tujuan menggunakan ddNTPs?

Video: Apakah tujuan menggunakan ddNTPs?

Video: Apakah tujuan menggunakan ddNTPs?
Video: 7.1 Sanger Sequencing using Dideoxyribonucleic Acid Nucleotides (ddNTPs) 2024, November
Anonim

DdNTP merujuk kepada Dideoxynucleotides trifosfat yang digunakan dalam kaedah dideoksi Sanger untuk menghasilkan panjang untaian DNA yang berbeza untuk penjujukan DNA. Ini mengakibatkan penamatan proses pempolimeran DNA(atau pemanjangan DNA) kerana proses ini memerlukan kumpulan 3'-OH untuk diteruskan.

Oleh itu, mengapakah ddNTP digunakan dalam penjujukan?

Dideoxynucleotides adalah perencat memanjang rantai DNA polimerase, digunakan dalam kaedah Sanger untuk DNA penjujukan . Dideoxyribonucleotides tidak mempunyai kumpulan hidroksil 3', oleh itu tiada pemanjangan rantai selanjutnya boleh berlaku sebaik sahaja dideoxynucleotide ini berada pada rantai. Ini boleh menyebabkan penamatan DNA urutan.

Begitu juga, adakah ddNTP dilampirkan pada dNTP? Satu atau lebih daripada dNTP dilabel secara radioaktif untuk membantu menggambarkan produk replikasi. Akhirnya, setiap tiub mendapat satu daripada empat nukleotida khas yang dipanggil dideoxynucleotides ( ddNTPs ). Walau bagaimanapun, apabila digabungkan, polimerase DNA tidak dapat melanjutkan rantaian kerana ia memerlukan 3'-OH untuk melampirkan kepada nukleotida seterusnya.

Begitu juga seseorang mungkin bertanya, bagaimanakah ddNTP menghentikan tindak balas penjujukan?

Apabila terdapat dalam jumlah yang kecil dalam tindak balas urutan , dideoxyribonucleoside triphosphates ( ddNTPs ) menamatkan tindak balas penjujukan pada kedudukan yang berbeza dalam helai DNA yang semakin meningkat. ddNTP menghentikan tindak balas penjujukan kerana mereka: menyebabkan polimerase DNA jatuh dari helai templat. c.

Apakah teknik yang melibatkan Dideoxynucleotides boleh digunakan?

Urutan Sanger ialah a kaedah penjujukan DNA berdasarkan penggabungan terpilih penamatan rantai dideoxynucleotides oleh DNA polimerase semasa replikasi DNA in vitro. Dibangunkan oleh Frederick Sanger dan rakan sekerja pada tahun 1977, ia adalah yang paling meluas digunakan penjujukan kaedah selama lebih kurang 40 tahun.

Disyorkan: