Apa yang berlaku jika anda menambah terlalu banyak enzim sekatan?
Apa yang berlaku jika anda menambah terlalu banyak enzim sekatan?

Video: Apa yang berlaku jika anda menambah terlalu banyak enzim sekatan?

Video: Apa yang berlaku jika anda menambah terlalu banyak enzim sekatan?
Video: Mulailah Makan 1 Tomat Setiap Hari dan Lihat Hasilnya 2024, Disember
Anonim

Pencernaan yang tidak lengkap mungkin berlaku apabila terlalu banyak atau juga sedikit enzim digunakan. The kehadiran bahan cemar dalam yang sampel DNA boleh menghalang enzim , juga mengakibatkan penghadaman yang tidak lengkap. Beberapa enzim sekatan memerlukan kofaktor untuk aktiviti penuh.

Selain itu, mengapakah enzim sekatan ditambah terakhir?

The enzim sekatan biasanya adalah terakhir komponen tambah kepada tindak balas untuk memastikan ia tidak terdedah kepada keadaan yang melampau. Tindak balas yang dipasang hendaklah dicampur selepas enzim tambahan. Campurkan semua larutan yang mengandungi enzim sekatan perlahan-lahan untuk mengelak enzim penyahaktifan.

Tambahan pula, bagaimanakah penghadaman enzim sekatan boleh diperbaiki? Gunakan tidak lebih daripada yang disyorkan enzim jumlah (mis., 10 unit daripada enzim setiap mikrogram DNA). Kurangkan jumlah enzim dalam tindak balas, jika perlu. Elakkan pengeraman berpanjangan penghadaman tindak balas. Gunakan penimbal tindak balas yang disyorkan.

Juga tahu, mengapa enzim sekatan tidak dipotong?

Penyediaan DNA untuk dibelah sepatutnya bebas daripada bahan cemar seperti fenol, kloroform, alkohol, EDTA, detergen atau garam berlebihan, yang semuanya boleh mengganggu enzim sekatan aktiviti. Jika perencat (selalunya garam, EDTA atau fenol) hadir, DNA kawalan akan tidak dipotong selepas sebati.

Mengapakah jumlah enzim boleh menyebabkan aktiviti bintang?

Aktiviti bintang adalah kelonggaran atau pengubahan kekhususan sekatan enzim belahan pengantara DNA yang boleh berlaku di bawah keadaan tindak balas yang berbeza dengan ketara daripada yang optimum untuk enzim . Aktiviti bintang boleh berlaku kerana kehadiran Mg2+, sebagai ialah dilihat dalam HindIII, sebagai contoh.

Disyorkan: