Isi kandungan:

Bagaimanakah anda memasukkan gen ke dalam plasmid?
Bagaimanakah anda memasukkan gen ke dalam plasmid?

Video: Bagaimanakah anda memasukkan gen ke dalam plasmid?

Video: Bagaimanakah anda memasukkan gen ke dalam plasmid?
Video: AP Biology: рестрикционные ферменты переваривают циркулярные плазмиды 2024, November
Anonim

Langkah-langkah asasnya ialah:

  1. Potong buka plasmid dan "tampal" dalam gen . Proses ini bergantung pada enzim sekatan (yang memotong DNA) dan ligase DNA (yang bergabung dengan DNA).
  2. Sisipkan yang plasmid ke dalam bakteria.
  3. Membesar dengan banyak plasmid -membawa bakteria dan menggunakannya sebagai "kilang" untuk membuat protein.

Juga, bagaimanakah gen boleh dimasukkan ke dalam GCSE plasmid?

ia adalah dimasukkan ke dalam plasmid menggunakan enzim ligase. yang plasmid pergi ke dalam sel bakteria. bakteria transgenik membiak, terhasil dalam berjuta-juta bakteria yang sama yang menghasilkan insulin manusia.

Selain itu, bagaimanakah anda mensubklonkan gen? Langkah Asas untuk Subkloning Anda melepaskan dan memurnikan sisipan anda daripada vektor induk, mengikat sisipan ini menjadi vektor destinasi yang disediakan, mengubah tindak balas pengikatan ini kepada sel bakteria yang kompeten. Kemudian anda menyaring sel yang diubah untuk sisipan.

Dengan mengambil kira perkara ini, apakah 4 langkah pengklonan gen?

Dalam protokol penghadaman enzim sekatan klasik dan pengklonan ligation, pengklonan mana-mana serpihan DNA pada dasarnya melibatkan empat langkah:

  • pengasingan DNA yang diminati (atau DNA sasaran),
  • ligasi,
  • pemindahan (atau transformasi), dan.
  • prosedur saringan/pemilihan.

Bagaimanakah anda menguatkan plasmid?

Prosedur Eksperimen

  1. Jalankan PCR dan bersihkan produk PCR: Jalankan PCR untuk menguatkan DNA sisipan anda.
  2. Hadam DNA anda:
  3. Asingkan sisipan dan vektor anda dengan penulenan gel:
  4. Ikatkan sisipan anda ke dalam vektor anda:
  5. Transformasi:
  6. Asingkan Plasmid Selesai:
  7. Sahkan Plasmid anda dengan Penjujukan:

Disyorkan: