Apabila melakukan skrin putih biru putih koloni bakteria mengandungi?
Apabila melakukan skrin putih biru putih koloni bakteria mengandungi?

Video: Apabila melakukan skrin putih biru putih koloni bakteria mengandungi?

Video: Apabila melakukan skrin putih biru putih koloni bakteria mengandungi?
Video: Как выполнить сине-белый скрининг 2024, April
Anonim

Sebaliknya, koloni putih tidak boleh memetabolismekan X-Gal untuk menghasilkan biru warna, kerana mereka tidak menghasilkan β-galactosidase berfungsi selepas mengambil plasmid yang membawa DNA yang dimasukkan dan mengganggu gen lacZ α. Ini koloni putih mengandungi yang bergabung semula bakteria dan harus dipilih (Gambar 1).

Dengan cara ini, adakah semua koloni putih dan biru mengandungi plasmid?

The koloni biru mengandungi "diri" bergantung plasmid itu buat tidak mempunyai sisipan DNA yang mengganggu gen lac Z. Tanah jajahan putih terdiri daripada bakteria yang membawa plasmid yang mempunyai DNA memasukkan serpihan yang mengganggu gen lac Z. Pemilihan akan dilakukan pada ampisilin mengandungi sederhana.

Begitu juga, apakah tujuan pemeriksaan biru putih? The biru – putih skrin adalah saringan teknik yang membolehkan pengesanan bakteria rekombinan dengan cepat dan mudah dalam eksperimen pengklonan molekul berasaskan vektor. DNA yang diminati diikat menjadi vektor.

Mengingat ini, apakah pemeriksaan koloni putih biru?

The biru - skrin putih ialah saringan teknik yang memungkinkan untuk mengesan ligasi yang berjaya dalam pengklonan gen berasaskan vektor. DNA yang menarik dihubungkan menjadi vektor. Jika ligation berjaya, bakteria tanah jajahan akan jadi putih ; jika tidak, yang tanah jajahan akan jadi biru.

Mengapa sebilangan koloni berwarna biru dan yang lain berwarna putih?

Sebarang tanah jajahan yang mengandungi plasmid (dan oleh itu gen β-galactosidase yang berfungsi) akan bertukar biru , hasil daripada aktiviti β-galactosidase. Ini dipanggil α-pelengkap. Sisipan itu mengganggu gen β-galactosidase, dan oleh itu tanah jajahan kekal putih.

Disyorkan: